课程简介:
简单染色法:
不同细菌或者由于观察者所侧重观察的内容不同,所以使用的染料也有差异,但是简单染色的方法是一样的。制成需要观察的玻片后,使用相对应的染料滴加到玻片上的菌膜区域,以覆盖菌膜为准。按照不同染料的要求,结合所观察的内容确定染色时间,染色时间到达时,进行水洗,干燥等步骤。最后得到的玻片加盖盖玻片即可进行镜检。
制备细菌染色片一般要经过涂片、固定、染色、水洗、干燥等步骤,然后用显微镜甚至油镜观察。
1、涂片
取干净载玻片一块,在载玻片的左、右各加一滴蒸馏水,按无菌操作法取菌涂片,亦可直接在载玻片上制薄得涂面,注意取菌不要太多涂布面一般以直径1cm大小范围为宜。
2、固定
手执玻片一端,有菌膜的一面朝上,通过微火三次(用手指触摸涂片反面,以不烫手为宜)。待玻片冷却后,再加染色液。
3、染色
玻片置于玻片搁架上,加适量(以盖满菌膜为度)草酸铵结晶紫染色液(或石碳酸复红液)于菌膜部位,染1~2 min。
4、水洗
倾去染色液,用洗瓶中的无菌水,自玻片一端缓缓流向另一端,冲去染色液,冲洗至流下的水中无染色液的颜色为止。
5、干燥
用吸水纸吸去涂片边缘的水珠,置室温下自然干燥或微微加热,以加快干燥速度。注意用吸水纸时切勿将菌体擦掉。
6、镜检
用显微镜观察,并用铅笔绘出细菌形态图。
简单染色法是利用单一染料对细菌进行染色的一种方法。常用碱性染料进行简单染色。此法操作简便,适用于菌体一般形态和细菌排列的观察。不能辨别细菌细胞的构造。
染色技术是微生物学实验十分重要的基本技术
教学目标:
考核方式:
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细菌的简单染色法